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簡要描述:科瑪嘉李斯特菌顯色培養(yǎng)基用于單核細(xì)胞增生李斯特菌的檢測、分離和計(jì)數(shù)。且通過大量試驗(yàn)論證,結(jié)果顯示:法國科瑪嘉顯色培養(yǎng)基無論從顯色方面還是靈敏度、選擇性方面都明顯優(yōu)于其他品牌。
科瑪嘉李斯特菌顯色培養(yǎng)基使用說明書
組分
科瑪嘉李斯特菌顯色培養(yǎng)基和增補(bǔ)劑各一瓶。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:瓊脂 15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉 23.0 g/L 氯化鈉 5.0g/L
色素8.5 g/L
增 補(bǔ) 劑:9.0 g/L
pH值 7.0
操 作
1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:取瓶內(nèi)干粉51.5 g溶于1000 mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照51.5 g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。將溶解*的培養(yǎng)基高壓滅菌(121℃,15min)。
2、增補(bǔ)劑:取增補(bǔ)劑9g加入40ml無菌水中(可根據(jù)需要按照9g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備增補(bǔ)劑的量),用磁力攪拌器快速攪拌(700 rpm~1000rpm)均勻(時(shí)間不少于30分鐘),切勿加熱,使其*溶解,最終成為奶油狀的勻質(zhì)溶液。
3、把混勻后的增補(bǔ)劑加入到冷卻至47℃的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,在1~2min內(nèi)輕輕搖動(dòng)使其充分混勻,立即傾注平皿,使其凝固,晾干備用。注意:切勿疊放平板。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存2周(2℃8℃,避光)。
接種
劃線或涂布接種(冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫),在36
結(jié)果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes) | 藍(lán)色,邊緣整齊帶有白色暈環(huán)(直徑) |
其他微生物 | 藍(lán)色,無色,抑制 |
性能及局限
部分伊氏李斯特菌(L.ivanovii)有時(shí)出現(xiàn)和單核增生李斯特菌相似的菌落,但是伊氏李斯特菌是食品工業(yè)中一種罕見菌。蠟樣芽胞桿菌(B.cereus)可產(chǎn)生藍(lán)色菌落但是菌落不規(guī)則、直徑較大,可與單核增生李斯特菌區(qū)分開來。
如用于直接分離,該培養(yǎng)基對單核增生李斯特菌的靈敏度和特異性接近100%,但是對于陽性結(jié)果應(yīng)用CHROMagar Identification Listeria顯色培養(yǎng)基確定,或者按照CEN,ISO,AFNOR標(biāo)準(zhǔn)方法所描述做包括純化步驟在內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)確定試驗(yàn)。通過快速方法得到的陽性結(jié)果,若未按上述標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行確定試驗(yàn),為保證結(jié)果的*性,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)做相應(yīng)試驗(yàn)以糾正結(jié)果的有效性。
貯存條件
基礎(chǔ)干粉貯存于2℃~30℃干燥環(huán)境中,增補(bǔ)劑貯存于2℃~8℃環(huán)境中,在有效期前使用。
污染處理
使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。
附:供體外診斷使用,產(chǎn)品須專業(yè)人員操作。